PCR 実験も行っていますが、なぜいつも結果が他のものよりもはるかに悪いのですか?

PCR 実験も行っていますが、なぜいつも結果が他のものよりもはるかに悪いのですか?

実験室で他人のPCRを見て、増幅効率が高く、電気泳動ストリップが完璧で、自分のPCRを見て、長時間行うのが難しい、反応がとても良いと感じる、偽陽性のテストの結果……問題?

私たちのパートナーの多くも、さまざまな問題に直面していると思います。PCR実験で壁にぶつかると、無意識に反応系内の要因を分析してしまいますが、実験では消耗品の重要な影響を無視してしまうことがよくあります。

PCR の結果が間違っています。PCR の消耗品が根本的な原因である可能性があります。一方で、消耗品の微量汚染や阻害剤の導入は、実験的汚染を引き起こします。一方で、消耗品の選択を誤ると、実験結果が悪化します。

問題が再び発生します。PCR の消耗品には多くの種類がありますが、実験をよりスムーズに行うために適切な消耗品をどのように選べばよいのでしょうか。注意が必要な問題は何ですか?心配しないで、今日I 長年の経験と組み合わせて、PCR消耗品の選択に共通の問題を整理し、あなたのお役に立てれば幸いです。

 

Q1: PCR の消耗品はなぜ通常 PP 素材でできているのですか?

Huida: PCR 用品は通常、試薬またはサンプルと直接接触するため、ポリプロピレン (PP) 材料は生物学的に不活性であり、生体分子に付着せず、優れた化学的耐性と温度耐性を備えています (121 でオートクラップすることができます)。 ° C、熱サイクル中の温度変化にも耐えることができます)。

 

Q2: 異なるサイズの PCR チューブ/プレートからどのように選択すればよいですか?

HUIDA: 選択の目的: 特定の実験要件に従って適切な製品を選択します。PCR チューブのサイズのほとんどは、PCR 反応の要件を満たすことができます。これに基づいて、最初に低容量のチューブを選択することをお勧めします。容積の小さい反応管・プレートは、上部のスペースが小さいため、熱伝導率が向上し、蒸発が減少します。同時に、サンプルを多すぎたり少なすぎたりしないようにする必要があります。多すぎると熱伝導率の低下、こぼれ、相互汚染につながり、少なすぎるとサンプルの蒸発が失われる可能性があります。

一般的な反応管の仕様と容量:

単管・合体管:0.5ml、0.2ml、0.15ml

96ウェルプレート:0.2ml、0.15ml

384ウェルプレート:0.04ml

 

Q3: サンプル数が少ない場合、単管・複合管を選びますが、なぜカバーが平型とカバーが凸型のものがあるのでしょうか?

Huida: サンプル量が少ない場合は、単一のチューブまたは結合されたチューブが優先されます。ただし、反応量が多い場合は単管が支配的となり、0.5 mLに達することもあります。フラットカバーとコンベックスカバーにはそれぞれ利点があります。具体的には、以下の情報を参照できます。

単一のチューブ: 0.2ml および 0.5ml; サンプル量を柔軟に選択できます。

接続チューブ: 0.2ml または 0.15ml はオプションです。8本または12本のチューブが一般的です。

フラット カバー: qPCR 用の正確な蛍光シグナル伝達を提供できます。マークが書きやすい。

凸型カバー:PCR 装置のホットカバーに接触し、圧力による反応チューブの変形を減らします。ただし、蛍光信号の伝達に影響を与えるため、qPCR 実験には適用できません。

 

Q4: PCR プレートにスカートがあるものとないものがあるのはなぜですか?

Huida: 実際、PCR プレートのスカートは、自動化アプリケーションによりよく適合するように設計されており、機器の安定したサポートと機械的耐久性、およびピペッティング プロセス中のより高い安定性を提供します。

PCRプレートは、一般的にノンヘムライン、ハーフヘムライン、フルヘムラインに分けられます。

なし プレート: ほとんどの PCR マシンまたは qPCR マシンに適していますが、自動化アプリケーションには適していません。ピペッティングの際の安定性は高くないので、プレートサポートで使用する必要があります。

ハーフスカートエッジプレート:ラベルやバーコードの塗布、自動塗布に対応でき、ピペッティング安定性に優れています。

フル スカート エッジ プレート: 自動化された実験アプリケーションに最適で、バーコードのラベルとアプリケーションにも適用できます。機械的強度が高く、バルジ モジュール PCR 装置に使用でき、ピペッティング プロセスの安定性が高いです。

 

Q5 :PCR プレートの角とラベルがまったく同じでないのはなぜですか?

フイダ:角切りやマーキングの効果にもよりますね。

コーナーカット: PCR プレートのコーナーカット位置の選択は、簡単に配置できる適切な機器の要件によって異なります。

識別: PCR プレート上の英数字マーカーは、個々のウェルとサンプルの位置を識別するのに役立ちます。一般的に、エンボス加工されたカラー デジタル ロゴまたは刻印されたロゴ用です。一部の自動化されたアプリケーションでは、印刷およびマークされた反応プレートの方が密閉されます。

 

Q6: 凸型の PCR プレートとフラットな PCR プレートがあるのはなぜですか? どれが良いですか?

フイダ: 合うものがベストです。一般的な PCR プレートには、フラット ポア マージンとハイ ポア マージンの 2 種類があります。

ほとんどの PCR 装置に適したフラット ホール マージン反応プレート。

オリフィスのエッジが高くなった反応プレートにより、膜のシーリングが容易になり、サンプル間のクロスコンタミネーションのリスクが軽減されます。

 

Huida は、PCR 製品および業界の高水準の製造および処理において長年の経験を持っています。製品ラインアップは豊富で、ほとんどの PCR 実験アプリケーションに対応できます。実験用途に適した製品をお選びください。

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投稿時間: 2021 年 6 月 3 日